A fluoreszcens mikroszkópia forradalmasította a biológiai minták vizualizálásának és tanulmányozásának képességét, lehetővé téve számunkra, hogy elmélyüljünk a sejtek és molekulák bonyolult világában. A fluoreszcens mikroszkópia kulcsfontosságú eleme a fényforrás, amelyet a mintán belüli fluoreszcens molekulák gerjesztésére használnak. Az évek során különféle fényforrásokat alkalmaztak, amelyek mindegyike egyedi jellemzőkkel és előnyeivel rendelkezik.
1. Higanylámpa
Az 50 és 200 watt közötti nagynyomású higanylámpa kvarcüvegből készült, és gömb alakú. Bizonyos mennyiségű higanyt tartalmaz. Működése közben két elektróda között kisülés lép fel, aminek következtében a higany elpárolog, és a gömb belső nyomása gyorsan megnő. Ez a folyamat általában körülbelül 5-15 percet vesz igénybe.
A nagynyomású higanylámpa emissziója a higanymolekulák szétesése és redukciója az elektródák kisülése során, ami fényfotonok kibocsátásához vezet.
Erős ultraibolya és kék-ibolya fényt bocsát ki, így alkalmas különféle fluoreszcens anyagok izgatására, ezért széles körben alkalmazzák a fluoreszcens mikroszkópiában.
2. Xenon lámpák
A fluoreszcens mikroszkópiában egy másik gyakran használt fehér fényforrás a xenon lámpa. A xenon lámpák a higanylámpákhoz hasonlóan széles hullámhossz-spektrumot biztosítanak az ultraibolya sugárzástól a közeli infravörösig. Azonban gerjesztési spektrumaikban különböznek.
A higanylámpák emissziójukat a közeli ultraibolya, kék és zöld tartományba koncentrálják, ami biztosítja a fényes fluoreszcens jelek generálását, de erős fototoxicitással jár. Következésképpen az HBO lámpákat általában rögzített mintákhoz vagy gyenge fluoreszcens képalkotáshoz tartják fenn. Ezzel szemben a xenon lámpaforrások simább gerjesztési profillal rendelkeznek, ami lehetővé teszi az intenzitás összehasonlítását különböző hullámhosszokon. Ez a jellemző olyan alkalmazásoknál előnyös, mint a kalciumion-koncentráció mérése. A xenon lámpák a közeli infravörös tartományban is erős gerjesztést mutatnak, különösen 800-1000 nm körül.
Az XBO lámpák a következő előnyökkel rendelkeznek az HBO lámpákkal szemben:
① Egyenletesebb spektrális intenzitás
② Erősebb spektrális intenzitás az infravörös és a középső infravörös tartományban
③ Nagyobb energiakibocsátás, ami megkönnyíti az objektív rekesznyílásának elérését.
3. LED-ek
Az elmúlt években egy új versenyző jelent meg a fluoreszcens mikroszkópos fényforrások területén: a LED-ek. A LED-ek előnye, hogy ezredmásodperc alatt gyorsan ki-be kapcsolnak, csökkentve a minta expozíciós idejét és meghosszabbítva a kényes minták élettartamát. Ezenkívül a LED-fény gyors és precíz lebomlást mutat, jelentősen csökkentve a fototoxicitást a hosszú távú élő sejtes kísérletek során.
A fehér fényforrásokhoz képest a LED-ek jellemzően szűkebb gerjesztési spektrumon belül bocsátanak ki. Azonban több LED-sáv is elérhető, lehetővé téve a sokszínű, többszínű fluoreszcencia alkalmazásokat, így a LED-ek egyre népszerűbbek a modern fluoreszcens mikroszkópos beállításokban.
4. Lézerek fényforrása
A lézerfényforrások erősen monokromatikusak és irányítottak, így ideálisak nagy felbontású mikroszkópiákhoz, beleértve a szuperfelbontású technikákat, mint például a STED (stimulált emissziócsökkentés) és a PALM (fotoaktivált lokalizációs mikroszkópia). A lézerfényt általában úgy választják ki, hogy megfeleljen a célfluoroforhoz szükséges specifikus gerjesztési hullámhossznak, ami nagy szelektivitást és pontosságot biztosít a fluoreszcens gerjesztésben.
A fluoreszcens mikroszkóp fényforrás kiválasztása a konkrét kísérleti követelményektől és a minta jellemzőitől függ. Kérjük, forduljon hozzánk bizalommal, ha segítségre van szüksége
Feladás időpontja: 2023.09.13